o principal diferença entre nitrocelulose e membrana de náilon é que o A membrana de nitrocelulose tem uma alta afinidade para a ligação de proteínas, enquanto a membrana de náilon tem uma alta afinidade para a ligação de ácido nucléico. Além disso, as interações hidrofóbicas e eletrostáticas ligam as macromoléculas às membranas de nitrocelulose, enquanto as interações iônicas, hidrofóbicas e eletrostáticas ligam as macromoléculas às membranas de náilon.

A nitrocelulose e a membrana de náilon são dois tipos de membranas para as quais as macromoléculas são transferidas do gel. No entanto, as membranas de nitrocelulose também podem ser usadas para ligar DNA e RNA.

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O que é uma membrana de nitrocelulose

A membrana de nitrocelulose é uma matriz comum usada em Western blotting devido à alta afinidade de ligação às proteínas. No entanto, pode ser usado para detectar ácidos nucléicos além de proteínas imobilizadas e glicoproteínas. A imobilização das macromoléculas ocorre principalmente por meio de interações hidrofóbicas. As ligações de hidrogênio também são formadas entre os grupos nitro da membrana e as cadeias laterais de aminoácidos das proteínas. A imobilização de proteínas será alta nas concentrações de sal alto e metanol baixas.

Figura 1: Princípio do Blot

As membranas de nitrocelulose estão disponíveis em formas 100% puras de nitrocelulose com uma grande área de superfície, que é uniforme. Os pré-tamanhos disponíveis são 0,2 μm e 0,45 μm. O tamanho de poro pequeno é melhor para a ligação com proteínas pequenas (<14 kDa). A capacidade de ligação e retenção das proteínas é de 80-250 μg / cm². As membranas pré-montadas estão prontas para uso. Uma das principais vantagens das membranas de nitrocelulose é seu fundo muito baixo, pois pode ser facilmente bloqueado. As membranas de nitrocelulose suportadas podem ser removidas e reexaminadas.

O que é uma membrana de nylon

A membrana de nylon é uma matriz amplamente utilizada para a ligação de ácidos nucléicos. As membranas de nylon são mecanicamente mais fortes do que as membranas de nitrocelulose. Os dois principais tipos de membranas de náilon usadas no blotting são Biodyne A e Biodyne B. O tamanho dos poros de ambos os tipos é de 0,45 μm. Eles são resistentes ao calor e solventes. Além disso, eles não encolhem, racham ou rasgam. Ambos fornecem um fundo inferior do que as membranas de nitrocelulose.

Figura 2: Membrana Southern Blot

Semelhanças entre nitrocelulose e membrana de nylon

Diferença entre nitrocelulose e membrana de nylon

Definição

Membrana de nitrocelulose se refere a uma membrana pegajosa usada para imobilizar ácidos nucléicos e proteínas no blotting, enquanto membrana de náilon se refere a um tipo de membrana com alta resistência e resistência ao calor usada para imobilizar macromoléculas.

Feito de

As membranas de nitrocelulose são feitas de celulose nitrada, enquanto as membranas de náilon são feitas de náilon Biodyne A e Biodyne B não modificado ou carregado positivamente.

Tamanho de Poro

Os tamanhos dos poros das membranas de nitrocelulose são 0,2 μm e 0,45 μm, enquanto o tamanho dos poros das membranas de náilon é 0,45 μm.

Força

As membranas de nitrocelulose são quebradiças e, portanto, não reutilizáveis, enquanto as membranas de náilon são mecanicamente fortes.

Método de Transferência

A transferência eletroforética é usada principalmente na transferência de proteínas para as membranas de nitrocelulose, enquanto a transferência capilar é a prática comum com as membranas de náilon.

Afinidade

Membranas de nitrocelulose têm alta afinidade para proteínas, enquanto membranas de náilon têm alta afinidade para ácidos nucléicos. Membranas de nitrocelulose também podem ser usadas para ácidos nucléicos.

Blotting

Membranas de nitrocelulose são melhores para Western blotting, enquanto membranas de náilon são melhores para Southern e Northern Blotting.

Interações de ligação

As interações hidrofóbicas e eletrostáticas ligam as macromoléculas às membranas de nitrocelulose, enquanto as interações iônicas, hidrofóbicas e eletrostáticas ligam as macromoléculas às membranas de náilon.

Capacidade de ligação de proteína

A capacidade de ligação às proteínas da membrana de nitrocelulose é 80-250 μg / cm² enquanto a capacidade de ligação às proteínas da membrana de náilon é 150-200 μg / cm².

Conclusão

A membrana de nitrocelulose é uma membrana quebradiça usada principalmente para imobilizar proteínas em Western blotting, enquanto a membrana de náilon é uma membrana forte usada principalmente para imobilizar ácidos nucléicos. As membranas de nitrocelulose ligam as moléculas por meio de interações hidrofóbicas, enquanto as membranas de náilon ligam as moléculas por meio de interações eletrostáticas. Portanto, a principal diferença entre nitrocelulose e membrana de náilon é a afinidade.

Referência:

1. “Membranas de nitrocelulose para Western Blotting | Thermo Fisher Scientific - LK. ” Thermo Fisher Scientific, Thermo Fisher Scientific, disponível aqui2. “Biodyne A Nylon Membrane, 0,45 m, 8 Cm x 12 Cm.” Thermo Fisher Scientific, Thermo Fisher Scientific, disponível aqui3. “Biodyne B Nylon Membrane, 0,45 m, 8 Cm x 12 Cm.” Thermo Fisher Scientific, Thermo Fisher Scientific, disponível aqui

Cortesia de imagem:

1. “Blot biology” de Gbdivers - Trabalho do próprio (CC BY-SA 3.0) via Commons Wikimedia2. “Southern blot membrana” Por Bojan Žunar - Trabalho do próprio (CC BY-SA 4.0) via Commons Wikimedia