Diferentes corantes são usados ​​na coloração de diferentes materiais biológicos. As manchas reagem com uma substância específica em uma amostra biológica, dando uma cor específica a essa substância. A acetocarmina é uma coloração usada para a demonstração de ácidos nucléicos dentro do cromossomo. Existem também algumas outras razões que tornam a acetocarmina mais adequada como corante de ácido nucléico. Eles são discutidos neste artigo.

Principais áreas cobertas

1. O que é uma mancha - Definição, tipos de manchas 2. O que é acetocarmina - Definição, Características, Preparação 3. Por que a acetocarmina é usada em estudos de cromossomos mitóticos - Preparação, Uso de Acetocarmina

Termos-chave: acetocarmina, cromossomos, formaldeído, hidrólise, estudos de cromossomos mitóticos, manchas

O que é mancha

A coloração é uma técnica usada em estudos microscópicos de amostras biológicas para aumentar o contraste da amostra biológica sob o microscópio. Ele destaca as estruturas do tecido biológico, como populações de células específicas, organelas, DNA, proteínas, carboidratos e lipídios. A mancha pode ser produtos químicos sintéticos ou naturais originados de plantas ou animais. Os métodos de coloração são descritos abaixo.

1. Coloração única - Na coloração única, apenas uma coloração é usada para dar uma única cor a toda a amostra biológica.
2. Coloração dupla - Na coloração dupla, duas colorações são usadas para tingir organelas específicas ou uma área específica.
3. Coloração múltipla - Na coloração múltipla, mais de duas colorações são usadas para a coloração específica de componentes como organelas na amostra.

O que é acetocarmina

Carmine é um corante básico preparado a partir de um inseto conhecido como Coccus cacti. A acetocarmina é produzida pela mistura de carmina com ácido acético glacial. É uma coloração específica de DNA usada para a visualização de cromossomos superenrolados durante os diferentes estágios da mitose.

Preparação de coloração de acetocarmina

1. Dissolva 10 g de carmim em 1 L de ácido acético glacial a 45%.
2. Adicionar grânulos de alumínio e refluir por 24 h.
3. Filtrar em frascos escuros e armazenar a 4 ° C.
4. A coloração pode ser intensificada pela adição de cloreto férrico (adicionar 5 mL de uma solução de cloreto férrico a 10% por 100 mL de acetocarmina%).

Por que a coloração de acetocarmina é usada em estudos de cromossomos mitóticos

Geralmente, a acetocarmina é um corante usado em coloração única. Ele cora tanto o núcleo quanto o citoplasma. Para a coloração dos cromossomos mantendo o citoplasma incolor, a amostra biológica deve ser tratada primeiro com formaldeído e, a seguir, pode ser hidrolisada com HCl a 60 ° C com o tempo de hidrólise correto. Finalmente, pode ser tratado com acetocarmina. A acetocarmina produz grandes agregados de corante em condições fracamente ácidas (pH 4-5). A demonstração da mitose da raiz da cebola pela coloração com acetocarmina é mostrada na figura 1.

Figura 1: Mitose de raiz de cebola

No entanto, a acetocarmina é ligeiramente tóxica do que as outras manchas de ácido nucleico, como a aceto-orceína. Também é mais barato do que outros tipos de manchas.

Conclusão

As manchas são usadas em estudos microscópicos para aumentar o contraste de componentes biológicos específicos em uma amostra. A acetocarmina é um corante usado para corar o ácido nucléico dentro das células. Como a acetocarmina marca especificamente os cromossomos separados do citoplasma, ela pode ser usada para visualizar os cromossomos em estudos mitóticos.

Referência:

1. “COLORAÇÃO DE ACETOCARMINA”. Kansas State University, disponível aqui. 2.J. A. Rattenbury (2009) Specific Staining of Nucleolar Substance with Aceto-Carmine, Stain Technology, disponível aqui.

Cortesia de imagem:

1. “Mitose de raiz de cebola” Por staticd - Trabalho próprio (CC BY-SA 3.0) via Commons Wikimedia